Dark Field Microscopy: Væsentlige færdigheder og viden om principper
Lad os først og fremmest tale om strukturen og egenskaberne ved det mørke feltmikroskop, hvorfor det kaldes et mørkt feltmikroskop, hvilke eksperimenter kan bruge det, og hvordan man bruger det godt. Du vil have en detaljeret forståelse af denne artikel.
Den første er strukturen af det mørke feltmikroskop. I vores daglige liv er det ikke let at se det partikelformige støv, der flyver indendørs, men i et mørkt rum, hvis en lysstråle kommer i skråt fra dørens revne, kan støvpartikler ses, hvilket er et optisk Dindar -fænomen. Det mørke feltmikroskop er designet baseret på dette princip. Dets strukturelle træk er hovedsageligt at bruge en central skyggeplade eller en mørk feltkondensator, der ofte bruges som en parabolsk kondensator, så den centrale stråle af lyskilden er blokeret og ikke kan komme ind i den objektive linse gennem prøven fra bund til top. Så lyset ændrer sin sti og skråt skinner på det observerede eksemplar, og prøven reflekterer eller spreder, når det møder lyset, og det spredte lys sættes i den objektive linse, så hele synsfeltet er mørkt. Det, der observeres i det mørke felt, er det diffraherede lysbillede af det inspicerede objekt, ikke selve objektet, så kun eksistensen og bevægelsen af objektet kan ses, og objektets fine struktur kan ikke skelnes. Når det inspicerede objekt er heterogen og større end 1/2 bølgelængde, indgår alle niveauer af diffracerede stråler imidlertid den objektive linse på samme tid, og objektets struktur kan i nogen grad observeres. Selvom det generelle mørke feltmikroskop ikke kan se den fine struktur af objektet tydeligt, kan det skelne eksistensen og bevægelsen af partikler over 0. 0 04 um, som er en karakteristik, som almindelige mikroskoper (den maksimale opløsning er 0,2 um) ikke har, og kan bruges til at observere strukturen i levende celler og bevægelsen af partikler i celler.
For at fremstille den centrale skyggeplade kan det almindelige mikroskop omdannes til et mørkt feltmikroskop, så længe kondensatoren er aftagelig, og brackets diameter er velegnet til installation af det mørke feltkondensator. Når der ikke er nogen mørk feltkondensator, kan der fremstilles en central skyggeplade af tykt sort papir og placeres på filterrammen under kondensatoren af det almindelige mikroskop, og den mørke felteffekt kan også opnås.
Juster mikroskopkondensatoren til den højeste position, og juster brændvidden med et spejl med lav effekt.
Fjern okularet, observer og juster størrelsen på membranen fra linse tønden for at gøre det lig med synsfeltet for den objektive linse, der ses i linse tønden.
Skær det centrale lysskjold med tykt sort papir. Diameteren af den ydre ring er den samme som filterrammen, og størrelsen på den centrale del er den samme som for den justerede blænde af membranen (et lille stykke gennemskinneligt papir kan placeres på spejloverfladen af kondensatoren ved lyset, der passerer huller, og det lette plet, der vises på papiret, er aperturen af diaprikagmen, og derefter kan det måles med et træk).
Sæt det centrale lysskjold på filterrammen, og åbn åbningen for at observere prøven.
Hvis det er nødvendigt at observere det mørke felt med et højdrevet spejl, skal Central Light Shield genindføres i henhold til størrelsen på synsfeltet efter at have fokuseret med det højdrevne spejl.
Gem de centrale skyggeplader lavet af dem, så de kan bruges i senere eksperimenter.
Anvendelsesmetode. Installer den mørke feltkondensator på kondensatorbeslaget på mikroskopet.
Vælg en stærk lyskilde, men forhindrer direkte lys i at indtaste den objektive linse, så brug generelt en mikroskopelampe til belysning.
En dråbe duftende asfalt skal tilsættes mellem kondensatoren og prøven for at forhindre, at belysningslamperen bliver fuldstændigt reflekteret på kondensatoren, og det detekterede objekt kan ikke nås, så det mørke feltbelysning ikke kan opnås.
At løfte den lette samler og sigte fokus for den lette samler på det detekterede objekt, det vil sige bestrålet det detekterede objekt med keglestrålens toppunkt. Hvis kondensatoren kan bevæge sig vandret og er udstyret med en centerjusteringsenhed, skal centerjusteringen først udføres, så kondensatorens optiske akse og mikroskopets optiske akse er strengt i en lige linje.
Vælg den objektive linse, der svarer til kondensatoren, juster brændvidden (driftsmetoden er den samme som for det almindelige mikroskop), og find det objektbillede, der skal observeres.
Endelig skal du observere de levende celler under Darkfield -mikroskopet på undervisningsplatformen. I den mørke baggrund kan de diffrakterede lysbilleder af celler, kerner og organeller ses.
